電穿孔法轉(zhuǎn)染如此“萬能”，為什么還要用其他方法？

同學(xué)們在進(jìn)行轉(zhuǎn)染時，肯定被各種各樣的轉(zhuǎn)染試劑挑花了眼吧。商業(yè)化的轉(zhuǎn)染試劑通常針對多重細(xì)胞類型、不同的核酸和各種特定的用途，也就是說，你要從種類繁多的試劑中挑選適合你的。

這時候，電穿孔法轉(zhuǎn)染就進(jìn)入了我們的視野。

電穿孔法轉(zhuǎn)染原理是通過脈沖電場，使得細(xì)胞膜上產(chǎn)生小孔，通透性被暫時的提高。周圍的小分子穿過小孔，擴(kuò)散到細(xì)胞內(nèi)。理論上說，電穿孔法轉(zhuǎn)染是可以對任何細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，可以轉(zhuǎn)染DNA、RNA、蛋白、糖類等，也不需要特殊的試劑。

但為什么還是有很多實(shí)驗(yàn)者選擇了脂質(zhì)體介導(dǎo)法等方案呢？原因如下

1、電穿孔法雖然不需要特殊試劑，但需要購買昂貴的電轉(zhuǎn)儀。

2、電穿孔法轉(zhuǎn)染會殺死細(xì)胞，因此需要較多的細(xì)胞和外源分子。

3、電穿孔法對實(shí)驗(yàn)者的操作水平要求較高。過低的電場強(qiáng)度、過長的電脈沖時間，會裂解細(xì)胞；電壓過低，過短的電脈沖時間則會降低轉(zhuǎn)染效率。

因此，電穿孔法不是真正的“萬能"，實(shí)驗(yàn)上也需要多學(xué)習(xí)、優(yōu)化。