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U937細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染試劑
更新時間:2024-06-26
訪問量:1203
廠商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:美國
U937細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染試劑高效率轉(zhuǎn)染條件分享
一、轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備
1. 轉(zhuǎn)染試劑用量:10ul
2. DNA/siRNA濃度:電訊
3. 細(xì)胞密度:1*106-1*105
4. 轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板:6孔板
5. 轉(zhuǎn)染試劑:zeta life ,Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑;
6. 轉(zhuǎn)染時間:15小時
7. 細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清:Z7181FBS-500胎牛血清
8. 細(xì)胞凍存液:L0100無血清細(xì)胞凍存液
注意:本細(xì)胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。
二、操作過程:
1.提前1天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在60-80%左右,再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
2. 核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例關(guān)系直接混合,用移液器吹打、混勻,室溫靜止15分鐘。
3.在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基里面可以含有血清。
4.細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染24小時后對細(xì)胞進(jìn)行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。
5.分析結(jié)果:質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染48-72小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96小時檢測mRNA或蛋白表達(dá)。若進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后24-48小時左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA轉(zhuǎn)染后9小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72小時檢測mRNA或蛋白表達(dá)。
U937細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染試劑貨號規(guī)格:
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600025 0.25ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600050 0.5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600075 0.75ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600150 1.5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600500 5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD601000 10ml