小鼠皮下成瘤3D基質膠

小鼠皮下成瘤3D基質膠

應用：

•3D 細胞球體培養(yǎng) 

•小鼠皮下成瘤 

•細胞侵襲 

•適合用于 3D 細胞藥物篩檢平臺 

•細胞生長和分化 

•代謝/毒理學研究

樣本類型： 

•腫瘤細胞系、哺乳動物組織

小鼠皮下成瘤3D基質膠試劑盒組分

小鼠皮下成瘤實驗準備程序 

A、細胞房內材料準備、試劑制備及步驟

(1) 材料準備: 

1. 冰盒、

2. 37 ℃ 水浴槽、

3. C 緩沖溶液(10X)、

4. 無血清細胞培養(yǎng)液 (例如: 無血清 DMEM，DMEM-F12等，不可用 PBS )、

5. A 膠 (2X)、

6. 細胞培養(yǎng)液、

7. 23-26G 針頭、

8. 1 mL 針筒、

9. 細胞。

(2) 試劑制備:

1、C 緩沖溶液 (0.5 X) 制備 : 使用 37 ℃ 水浴回溫的無血清細胞培養(yǎng)液 (例如: 無血清 DMEM 或 DMEM-F12 等，不可用 PBS ) 稀釋 C 緩沖溶液 (10 X) 至 C 緩沖溶液 (0.5 X), 即體積稀釋 20 倍。使用 前放置 37 度水浴槽。(例如:1 mL C 緩沖溶液 (10 X) + 19 ml 無血清 DMEM; 若未使用完畢，可先保存于 4 ℃ 冰箱, 保存一周) 

2、A膠 (1X) 制備 : 將 A膠 (2X) (貨號:B-P-00002-A) 置于37 ℃ 水浴槽回溫10分鐘，確認*溶解。 再將 37 ℃ 水浴回溫的無血清細胞培養(yǎng)液取 0.5 mL，加至 37 ℃ 已溶解的 0.5 mLA膠 (2X)，配置成 1 mL 的 A膠 (1X)。使用前置于37度，可降低黏度。 (單次使用，勿重復冷凍解凍 A膠 (1X) )

(3)步驟:

1、取細胞溶液離心后收集細胞沉淀，與C緩沖溶液 (0.5 X) 均勻混合使細胞濃度為3*106 cells/mL。

2、A膠 (1X) 與步驟 1 含 C緩沖溶液 (0.5 X) 的細胞系懸浮液，按照 2:1 比例均勻混合配置，細胞懸浮 液最終濃度為 106 cells/mL。使用前置于37℃，可降低黏度。 (C緩沖溶液用于A膠凝膠反應，例如0.5ml C 緩沖溶液(0.5 X)含細胞 加入 1ml A膠 (1X) 混合成1.5ml 的注射液) 

3、選用 23-26 G 的針頭 (建議選用 24 G) 及 1 mL 針筒，抽取 步驟2 A膠與 C緩沖溶液的細胞混合液 至所需注射體積 (例如:0.2-0.6 mL) 。室溫37℃至20℃操作抽取。 (若抽取時發(fā)生塞針狀態(tài)，可先把針頭 拔掉，以針筒進行抽取，建議一次抽取配置好所需針筒數量，避免步驟2 溶液過度凝膠，發(fā)生塞針)

4、將抽取好步驟 3 的針筒，帶入動物房, 若短時間無法施打建議置于冰上。

B、動物房內材料準備及步驟 (1)材料準備: 

1. 含 A膠與 C緩沖溶液的細胞混合液的針筒、

2. 皮膚消毒劑 (例如 : 酒精)、

3. 手套、

4. 實驗小鼠、

5. 麻醉小鼠的試劑

(2)步驟:

1、室溫下可直接注射。若是置于冰盒上的針筒，回到室溫后，待液化再進行注射。 含 A膠與 C緩沖溶液 的細胞混合液的針筒，以皮下注射方式，注射實驗所需的體積至實驗鼠 (建議皮下注射量為 0.2 mL，實際 狀況依需求而定)。(針筒放冰上注射阻力會上升, 放室溫會液化注射阻力小。注射時若因凝膠緣故而阻力變 大，需緩慢注射避免針頭噴落)

注1 : 注射體積可依不同實驗目的做調整，若為皮下血管生成研究注射體積需至少0.5 mL以上。

注2 : 此步驟依實驗需求可執(zhí)行或不執(zhí)行，若需呈現明顯的皮下注射隆起效果，可調整2.試劑制備將C緩沖 溶液 (10 X) 稀釋15倍，變成C緩沖溶液 (0.66 X)，再執(zhí)行后續(xù)成膠實驗；提高C濃度，可提高膠體硬度。

2、培養(yǎng)一至三周后觀察量測接種的腫瘤尺寸。

注 3 : 若為血管生成研究，應注射含 VEGF 及 heparin 的 A 膠，以促進血管生成。約三天后，可摘取含有 新血管生成的腫瘤組織.

B-P-00002系列基質膠可替代corning基質膠貨號：356234、356235、356237、356230、356231、354248、354263

深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基質膠現貨供應，經驗證可*替代BD/康寧的基質膠，來源為植物源且氨基酸序列100%人源化，無人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。